ISSN 1859-1558
TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM
Journal of Vietnam Agricultural Science and Technology
VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM

PHÁT TRIỂN PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH NHANH VÀ TIN CẬY BỆNH TRISTEZA TRÊN CAM BẰNG KỸ THUẬT ONE-STEP RT-PCR

Các Tác giả

Nguyễn Hữu Kiên, Tống Thị Hường, Nguyễn Thị Hòa, Đinh Thị Thu Ngần, Phạm Thị Hằng, Khuất Hữu Trung, Nguyễn Duy Phương, Nguyễn Lê Trang, Trần Thị Nhung

Từ khóa

Cây cam, bệnh tristeza, virus Citrus tristeza, RT-PCR một bước

Tóm tắt

Bệnh tristeza trên cây có múi là bệnh hại nguy hiểm do virus Citrus tristeza (CTV) gây ra và dẫn đến tàn lụi cây có múi, cuối cùng làm thiệt hại kinh tế nghiêm trọng cho các vùng trồng và sản xuất trên thế giới và Việt Nam. Những năm gần đây, diện tích cam ở miền Bắc nước ta đang ngày càng bị thu hẹp do sự bùng phát của bệnh tristeza. Do vậy, nhu cầu cây giống sạch bệnh là vô cùng lớn đối với các vùng sản xuất cam quan trọng; tuy nhiên, điều này làm cho việc sản xuất cây giống không có kiểm soát sẽ dẫn đến tình trạng bùng phát nghiêm trọng hơn. Để phát hiện CTV cho cây cam một cách nhanh chóng và đảm bảo độ tin cậy, kỹ thuật One-Step RT-PCR được sử dụng như là giải pháp tối ưu. RNA tổng số được tách chiết từ mẫu lá sử dụng Kít QIAGEN RNeasy Plant Mini. Bộ kít MyTaqTM One-Step RT-PCR được sử dụng cho phản ứng RT-PCR và cặp mồi đặc trưng cho gen mã hóa protein vỏ của virus để phát hiện bệnh CTV. Các sản phẩm PCR được điện di trên gel agarose 1% bổ sung Redsafe và hiển thị dưới máy UV quang phổ. Trường hợp các mẫu dương tính với CTV được nhận biết khi có 1 băng trùng với kích thước 672 bp; trong khi, những mẫu sạch thì không có sản phẩm khuếch đại. Như vậy, việc phát triển kỹ thuật RT-PCR một bước được sử dụng là phương pháp có độ nhạy và đáng tin cậy để phát hiện nhanh CTV trong các cây bị nhiễm bệnh ở giai đoạn sớm chưa có triệu chứng rõ ràng.

Ngày nhận bài

: 17/07/2024

Ngày chuyển phản biện

: 16/12/2024

Người phản biện

: TS. Lê Mai Nhất

Ngày duyệt đăng

: 26/12/2024

Đã xuất bản

25/01/2025

Cách trích dẫn

Lĩnh vực

Số thường kỳ