THIẾT KẾ CẤU TRÚC CRISPR/CAS9 BẤT HOẠT GEN SBEIIb Ở LÚA BẮC THƠM 7
Ngũ cốc có hàm lượng amylose (Amylose Content-AC) và tinh bột kháng (Resistant Starch-RS) cao mang lại những lợi ích tiềm năng cho sức khỏe con người. Gen SBEIIb (Starch Branching Enzyme IIb) biểu hiện chủ yếu ở hạt lúa, tham gia vào quá trình sinh tổng hợp amylopectin trong nội nhũ hạt, được xác định có vai trò quan trọng trong việc xác định cấu trúc mịn và các đặc tính vật lý của tinh bột. Trong nghiên cứu này, đoạn gen SBEIIb đã được phân lập từ DNA tổng số của giống lúa chủ lực Bắc Thơm 7 (BT7). Dựa trên kết quả giải trình tự đoạn gen SBEIIb, trình tự crARN đã được thiết kế và chèn vào vị trí BsaI trên vector trung gian pENTR4. Toàn bộ cấu trúc biểu hiện sgRNA (single guide ARN) nhận biết đặc hiệu SBEIIb đã được đưa vào vector chuyển gen thực vật pCas9 để tạo ra hệ thống CRISPR/Cas9 bất hoạt gen đích. Nghiên cứu này là cơ sở cho việc tạo ra giống lúa BT7 có AC cao bằng công nghệ chỉnh sửa gen ở Việt Nam.