ISSN 1859-1558
TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM
Journal of Vietnam Agricultural Science and Technology
VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM

NGHIÊN CỨU CHUYỂN CẤU TRÚC CRISPR/CAS9 VÀO GIỐNG NGÔ K7 NHẰM CHỈNH SỬA VÙNG PROMOTER CỦA GEN ZmCLE7

Các Tác giả

Nguyễn Hữu Kiên, Nguyễn Thị Hiệp, Nguyễn Thị Ngọc Minh, Nguyễn Thị Liễu, Khuất Hữu Trung, Đỗ Tiến Phát, Đoàn Thị Bích Thảo, Nguyễn Lê Trang

Từ khóa

Cây ngô, giống ngô K7, chỉnh sửa gen, cấu trúc CRISRP/Cas9

Tóm tắt

Công nghệ chỉnh sửa gen CRISPR/Cas9 là một bước đột phá quan trọng trong sinh học và nông nghiệp, cho phép thay đổi gen tại bất kỳ vị trí nào trong genome, mở ra tiềm năng cải thiện các đặc tính sinh học của cây trồng. Tuy nhiên, hiệu quả ứng dụng công nghệ này trong cây trồng, đặc biệt là ngô, phụ thuộc vào nhiều yếu tố như chủng vi khuẩn, mật độ vi khuẩn và điều kiện nuôi cấy. Nghiên cứu này tập trung tối ưu hóa quy trình chuyển gen vào phôi non giống ngô K7 thông qua vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens mang cấu trúc PZY102:GUS làm nền tảng để chỉnh sửa vùng promoter của gen ZmCLE7 bằng CRISRP/Cas9. Quy trình bao gồm: lây nhiễm phôi 11 ngày sau thụ phấn với dung dịch vi khuẩn (OD600 = 0,5) trong 30 phút, nuôi trên môi trường CCM 3 ngày, sau đó chuyển qua môi trường tạo mô sẹo ECM1, bổ sung 2 mg/L 2,4-D và 3 mg/L chất chọn lọc glufosinate trong 14 ngày. Tiếp theo, phôi được nuôi trên môi trường ECM2 với 6 mg/L glufosinate trong 14 ngày, rồi chuyển qua SEM1, SEM2 và cuối cùng là môi trường RM để tạo cây hoàn chỉnh. Kết quả PCR từ 6 cây sống sót cho thấy 1 cây chứa gen Cas9 và 2 cây chứa gen Bar, minh chứng khả năng chuyển cấu trúc CRISPR/Cas9 vào giống ngô K7. Nghiên cứu này đặt nền tảng quan trọng cho việc áp dụng công nghệ CRISPR/Cas9 nhằm nâng cao năng suất, chất lượng và khả năng chống chịu với điều kiện bất lợi ở cây ngô.

Ngày nhận bài

: 23/07/2024

Ngày chuyển phản biện

: 12/11/2024

Người phản biện

: TS. Huỳnh Thị Thu Huệ

Ngày duyệt đăng

: 06/12/2024

Đã xuất bản

25/01/2025

Cách trích dẫn

Lĩnh vực

Số thường kỳ