THIẾT KẾ CẤU TRÚC CRISPR/CAS9 NHẰM GÂY ĐỘT BIẾN TRÊN PROMOTER CỦA GEN ZmCLE7 Ở MỘT SỐ GIỐNG NGÔ VIỆT NAM
Ở Việt Nam, ngô là một trong những cây lương thực quan trọng. Nâng cao năng suất ngô, đặc biệt là trên các giống ngô bản địa năng suất thấp được đặc biệt quan tâm trong chương trình chọn tạo giống trong nước. Thời gian gần đây, các nghiên cứu khác nhau trên thế giới đã cho thấy việc tăng số hàng trên bắp do đột biến trên vùng trình tự promotercủa gen ZmCLE7 đã cải thiện đáng kể năng suất của cây ngô nghiên cứu. Vì thế trong nghiên cứu này, vector chỉnh sửa gen ZmCLE7 ứng dụng công nghệ CRISPR/Cas đã được phát triển đặc hiệu cho một số giống ngô bản địa có tiềm năng.Phân tích trình tự vùng promter của gen ZmCLE7 được phân lập và giải trình tự cho thấy trình tự của các giống bản địa là giống nhau đến 99%. Dựa trên trình tự vùng này của các giống bản địa, ba trình tự định hướng (gRNA) tạo đột biến ở promoter của gen ZmCLE7 đã được thiết kế. Các gRNA thu được có xác suất gây đột biến chính xác tại mục tiêu cao và an toàn cho các vùng ngoài mục tiêu. Các trình tự gRNA được nhân bản và ghép nối thành công vào khung vector chuyển gen pBUE411 để tạo thành hệ thống CRISPR/Cas9 (pBUE-PrCLE7). Hệ thống chỉnh sửa gen pBUE-PrCLE7 là kết quả khởi đầu quan trọng cho đột biến định hướng trên gen ZmCLE7 các giống ngô Việt Nam trong các nghiên cứu tiếp theo.