ISSN 1859-1558
TẠP CHÍ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM
Journal of Vietnam Agricultural Science and Technology
VIỆN KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM

THIẾT LẬP PHƯƠNG PHÁP PHÁT HIỆN TERMINATOR HSP17.3 PHỤC VỤ CHO SÀNG LỌC GMO BẰNG REAL-TIME PCR
 

Các Tác giả

Huỳnh Nguyễn Minh Nghĩa, Nguyễn Thị Kim Thoa, Nguyễn Xuân Dũng

Từ khóa

Sàng lọc GMO, heat shock protein, real-time PCR, terminator HSP17.3

Tóm tắt

Việc sàng lọc GMO trước đây chủ yếu dựa trên các trình tự promoter 35S và terminator NOS. Tuy nhiên, hiện nay đã có nhiều promoter và teminator mới như promoter maize ubiquitin và terminator heat shock protein (tHSP) đã được đưa vào cây trồng chuyển gen để làm tăng hiệu quả biểu hiện gen. Do đó cần phát triển quy trình phát hiện các trình tự mới này để bổ sung cho phương pháp phát hiện GMO. Nghiên cứu này thiết lập quy trình phát hiện và định lượng tHSP17.3 trong mẫu GMO bằng real-time PCR, trong đó, tHSP được khuếch đại và giải trình tự trước khi sử dụng cho thiết lập phản ứng real-time PCR. Giới hạn phát hiện (LOD) và định lượng (LOQ) của phản ứng real-time PCR cũng được xác định. Kết quả cho thấy, tHSP được khuếch đại có kích thước 164 bp và tương đồng 100% so với các trình tự tHSP đã công bố. Phản ứng real-time PCR có phương trình đường chuẩn y = –3,35x + 6,32, hệ số tương quan R2 = 0,99. Giới hạn phát hiện và định lượng của phản ứng đạt mức tương ứng 0,1 và 0,5%.
 

Ngày nhận bài

: 03/09/2023

Người phản biện

: PGS.TS. Khuất Hữu Trung

Ngày duyệt đăng

: 28/09/2023

Đã xuất bản

28/11/2023

Cách trích dẫn

Lĩnh vực

Số thường kỳ